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詳談olympus相差顯微鏡相關知識

更新時間:2016-08-03      瀏覽次數(shù):1619
   什么是olympus相差顯微鏡?
  olympus相差顯微鏡:光波有振幅(亮度)、波長(顏色)及相位(指在某一時間上光的波動所能達到的位置)的不同。當光通過物體時,如波長和振幅發(fā)生變化,人們的眼睛才能觀察到,這就是普通顯微鏡下能夠觀察到染色標本的道理。而活細胞和未經(jīng)染色的生物標本,因細胞各部微細結構的折射率和厚度略有不同,光波通過時,波長和振幅并不發(fā)生變化,僅相位有變化(相應發(fā)生的差異即相差),而這種微小的變化,人眼是無法加以鑒別的,故在普通顯微鏡下難以觀察到。能夠改變直射光或衍射光的相位,并且利用光的衍射和干涉現(xiàn)象,把相差變成振幅差(明暗差),同時它還吸收部分直射光線,以增大其明暗的反差。因此可用以觀察活細胞或未染色標本。
  olympus相差顯微鏡與普通顯微鏡的主要不同之處是:用環(huán)狀光闌代替可變光闌,用帶相板的物鏡(通常標有PH的標記)代替普通物鏡,并帶有一個合軸用的望遠鏡。環(huán)狀光闌是由大小不同的環(huán)狀孔形成的光闌,它們的直徑和孔寬是與不同的物鏡相匹配的。其作用是將直射光所形成的像從一些衍射旁像中分出來。相板安裝在物鏡的后焦面處,相板裝有吸收光線的吸收膜和推遲相位的相位膜。它除能推遲直射光線或衍射光的相位以外,還有吸收光使亮度發(fā)生變化的作用。調軸望遠鏡是用來進行合鈾調節(jié)的。相差顯微鏡在使用時,聚光鏡下面環(huán)f狀光闌的中心與物鏡光軸要*在一直線上,必需調節(jié)光闌的亮環(huán)和相板的環(huán)狀圈重合對齊,才能發(fā)揮相差顯微鏡的效能。否則直射光或衍射光的光路紊亂,應被吸收的光不能吸收,該推遲相位的光波不能推遲,就失去了相差顯微鏡的作用。
  olympus相差顯微鏡是非常成功的,并zui終獲得了廣泛的應用,從而在澤尼克獎的prestigeous諾貝爾物理學獎于1953年。相差技術譽為顯微鏡在一個世紀的zui偉大的進步。相差,通過“轉換”相如生活材料為振幅標本標本,使科學家能夠看到細節(jié)未染色和/或生活對象與以前從未實現(xiàn)的清晰度和分辨率。
 olympus相差顯微鏡有一些限制:
  · 相圖像通常光暈所包圍的輪廓細節(jié)。這樣的暈光的文物,有時模糊的邊界細節(jié)。
  · 相環(huán)空限制工作的光學系統(tǒng)的數(shù)值孔徑在一定程度上,從而降低分辨率。
  · 相差不厚的標本,因為在第二階段的轉變發(fā)生略低于或略高于平面處于焦點地區(qū)。這種相移的形象混淆和歪曲的圖像細節(jié)。
  · 如果使用白光和綠色,如果綠色過濾器是用來相圖像顯示為灰色。在過去,許多顯微鏡為黑色和白色相標本進行顯微攝影時限制他們的電影。今天,許多彩色膠片再現(xiàn)黑色,白色,和灰度非常有效,尤其是鎢均衡的透明膠片,富士,柯達,愛克發(fā)。
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